Mis on immunohistokeemia?

Immunohistokeemia on diagnostiline meetod, mida kasutatakse kudede proovide analüüsimisel antigeenide tuvastamiseks. See põhineb spetsiifiliste antikehade kasutamisel, mis seonduvad sihtantigeenidega ja võimaldavad nende visualiseerimist kudedel. Immunohistokeemiat kasutatakse laialdaselt meditsiinis, eriti onkoloogia valdkonnas, kus see aitab tuvastada kasvajaid ja hinnata ravivastust. See meetod võimaldab ka uurida kudede patoloogiat ning mõista Haiguste mehhanisme, täiendades paljusid teisi diagnostilisi meetodeid.

Immunohistokeemia (IHC) kasutab koeproovis antigeenide tuvastamiseks antikehi. See on üks laboritehnika, mida patoloog võib kasutada haiguse tunnuste kontrollimiseks pärast biopsiat. IHC-d kasutatakse tavaliselt vähi diagnoosimiseks, ravivastuse ennustamiseks ja haiguse tõenäoliste tulemuste (prognoosi) määramiseks.

Ülevaade

Mis on immunohistokeemia (IHC)?

Immunohistokeemia (IHC) on laboritehnika, mida patoloogid kasutavad koeproovist haiguse tunnuste otsimiseks. Patoloog kasutab meditsiiniliste seisundite diagnoosimiseks laborikatseid.

Teie diagnoosi osana võib tervishoiuteenuse osutaja eemaldada koe ja saata selle testimiseks laborisse. Näiteks võivad nad eemaldada osa kasvajast ja saata selle laborisse vähirakkude testimiseks. Seda nimetatakse biopsiaks. IHC on vaid üks meetod, mida patoloog võib laborisse saabuva proovi uurimiseks kasutada.

IHC on kõige levinum immuunvärvimise tüüp. Immunovärvimine hõlmab antikehade ja spetsiaalsete markerite kasutamist koeproovi osade “märgistamiseks”, et patoloogid saaksid neid hõlpsamini tuvastada.

Sõna “immunohistokeemia” annab vihjeid selle kohta, mis on seotud:

• Immuno tähendab, mis on seotud teie immuunsüsteemiga. Teie immuunsüsteem tuvastab teie kehas aineid (nimetatakse antigeenideks). See toodab antikehi, et leida ja hävitada mittekuuluvad antigeenid, nagu patogeenid (viirused, bakterid, seened ja parasiidid) ja vähirakud. IHC kasutab koeproovis olevate antigeenide tuvastamiseks ja haaramiseks antikehade antigeeni leidvaid omadusi. Antikehad värvivad proovi, nii et patoloog näeb mikroskoobi all vaadates antigeene, millega nad on seotud.
• Ajalugu tähendab kude. IHC uurib koeproovi.
• Keemia uurib väikseid ehitusplokke, mis moodustavad kogu aine, sealhulgas inimkude. IHC kasutab mikroskoopi, et näha muidu nähtamatuid antigeene, mis võivad viidata haigustele.

Millal tehakse immunohistokeemia?

IHC-d saab kasutada:

• Diagnoosige seisund: IHC võimaldab tervishoiuteenuse osutajatel diagnoosida selliseid haigusi nagu vähk. See võib aidata teenuseosutajatel määrata vähi tüüpi (nt kartsinoom, melanoom või sarkoom). Samuti võimaldab see tervishoiuteenuse osutajatel täpselt kindlaks teha leviva vähi (metastaatilise vähi) päritolu.
• Määrake prognoos: IHC suudab kindlaks teha, kui kõrge riskiga või agressiivne on vähk. Samuti võib see aidata pakkujatel vähi staadiumis ja astmes. See teave võib aidata teenuseosutajatel määrata parimad ravivõimalused.
• Ennusta ravivastust: IHC suudab tuvastada kasvajakoe omadusi, mis annavad vihjeid selle kohta, kuidas vähk võib ravile reageerida. Näiteks võivad patoloogid tuvastada rinna- ja eesnäärmevähki, mis tõenäoliselt kasvavad teatud hormoonide, nagu östrogeeni ja testosterooni, juuresolekul. Need vähid võivad kõige paremini alluda ravile, mis neid hormoone blokeerib (hormoonravi).
• Jälgige ravivastust: IHC võimaldab teenuseosutajatel jälgida, kas ravi toimib teie keha haigusest vabastamiseks.

Teadlased viivad läbi ka IHC-d, et välja töötada uusi ravimeid. IHC aitab teadlastel rohkem teada saada, kuidas teie keha väikseimad osad, nagu teie rakud ja nende sees olevad molekulid, töötavad. IHC annab ülevaate sellest, kuidas haigused neid protsesse mõjutavad ja millised ravimeetodid võivad aidata.

Milliseid haigusi saab diagnoosida immunohistokeemia abil?

Tervishoiuteenuse osutajad kasutavad vähi diagnoosimiseks kõige sagedamini IHC-d, kuid see võib diagnoosida ka muid haigusi, sealhulgas Alzheimeri tõbe, Parkinsoni tõbe ja lihasdüstroofiat.

See võib tuvastada ka nakkust põhjustavaid patogeene. Esimene edukas IHC plekk toimus 1941. aastal, kui teadlased (Coons jt) tuvastasid kopsupõletikuga seotud bakterid.pneumokokk) koeproovis.

Testi üksikasjad

Kuidas test töötab?

IHC kasutab koeproovis sihtantigeeni tuvastamiseks antikehi. Sihtantigeen on marker, mis näitab konkreetse haiguse esinemist. Kui antikeha tunneb antigeeni ära, kinnitub (seondub) sellega. Sidumisprotsess sarnaneb luku (antigeen) ja võtmega (antikehaga). Kui antikeha seondub antigeeniga, värvub koeproov mikroskoobi all vaadates teatud värvi.

See toimib järgmiselt:

• Patoloog seob antikeha ensüümiga, mis reageerib, kui antikeha seondub sihtantigeeniga.
• Antikeha seondub sihtantigeeniga, kui see on olemas.
• Kinnitus põhjustab ensüümi reaktsiooni.
• Reaktsioon paneb koeproovi mikroskoobi all vaadatuna värvima teatud värvi.

Et tulemused oleksid usaldusväärsed, peavad patoloogid täitma täpselt mitu sammu.

Proovi ettevalmistamine

Proovi ettevalmistamine tagab selle õige värvimise. Kui antigeen on olemas, paistab see taustal värviliste segmentidena silma. Proovi ettevalmistamiseks peavad patoloogid:

1. Säilitage kude. Kude koosneb rakkudest, mis aja jooksul surevad. Kudede säilitamine või “kinnitamine” aeglustab protsessi. Fikseerimine säilitab koe struktuuri, seega määrib see tõhusalt. Üks levinumaid aineid, mida koe fikseerimiseks kasutatakse, on formaliin, formaldehüüdi lahus.
2. Veenduge, et antigeenid oleksid kättesaadavad. Fikseerimisprotsess võib mõnikord blokeerida antigeeni osi, nii et antikeha ei saa sellega seonduda. Protsess, mida nimetatakse antigeeni otsimiseks, võib uuesti paljastada antigeeni sidumispunktid, et antikehad saaksid kinnituda.
3. Blokeerida sarnased struktuurid, kus antikeha võib seonduda. Mõnikord seostuvad antikehad ainetega, mis on struktuurilt sarnased sihtantigeeniga, kuid need ei ole samad. Patoloogid blokeerivad need struktuurid eelnevalt, nii et antikeha kinnitub ainult sihtantigeeniga.

Antikehade valimine

Patoloogid valivad välja antikehad, mis teadaolevalt seonduvad sihtantigeeniga. IHC kasutab kas polüklonaalseid või monoklonaalseid antikehi.

• Polüklonaalsed antikehad:Erinevate antikehade segu. Need antikehad võivad kinnituda antigeeni mitmele seondumissaidile.
• Monoklonaalsed antikehad: sama antikeha identsed koopiad. Monoklonaalsed antikehad kinnituvad ainult antigeeni spetsiifilisele sidumissaidile.

Antigeeni tuvastamine

Patoloogid valmistavad antikeha ette antigeeni sisaldava koe värvimiseks.

Patoloogid:

1. Ühendage antikehad ensüümiga. Ensüümide näideteks on mädarõika peroksidaas ja aluseline fosfataas.
2. Lisage koeproovile antikeha koos ensüümiga.
3. Vaadake proovi mikroskoobi all.
4. Otsige värvimist, mis näitab antigeeni olemasolu.

Esimene edukas IHC kasutas sarnast protsessi. Selle asemel, et siduda antikeha ensüümiga, sidusid teadlased selle fluorofooriga. Fluorofoor neelab valgust ja peegeldab seda. Fluorofoor värvib proovi, kui seda vaadata fluorestsentsmikroskoobi all. Seda tehnikat peetakse nüüd erinevat tüüpi immuunvärvimiseks, mida nimetatakse immunofluorestsentsiks.

Millised on immunohistokeemia piirangud?

Immunohistokeemia iga etapi jaoks pole standardseid juhiseid. Erinevad laborid kasutavad erinevaid tehnikaid, mis tähendab, et tulemused võivad erineda.

Samuti on hiljutised uuringud näidanud, et mitte kõik IHC jaoks saadaolevad antikehad ei tee seda, mida nad peaksid, st ei tuvasta proovis sihtantigeeni. Kui antikehadega on probleeme, võib test anda valed tulemused, sealhulgas:

• Valepositiivne: IHC tuvastab antigeeni, mis ei ole kohal.
• Valenegatiivne: IHC ei tuvasta antigeeni, mis on kohal.

Laborites peavad olema paigas kvaliteedikontrollid, et igal sammul säiliks kude ja oleks tagatud kvaliteetne plekk. IHC täpsuse parandamiseks saavad patoloogid testida antikehi koes, mis teadaolevalt sisaldab sihtantigeeni, et tagada selle värvimine enne tundmatu koeproovi testimist.

Kui täpne on immunohistokeemia?

Kui seda tehakse õigesti ja kvaliteedikontrollid on paigas, on immunohistokeemia usaldusväärne meetod vähi diagnoosimiseks. Üks uuring teatab, et IHC suudab täpselt tuvastada metastaatilise vähi esmase asukoha 70–90% täpsusega.

Täiendavad üksikasjad

Kas immunohistokeemia on biopsia?

Ei, aga need on omavahel seotud. Immunohistokeemia on ühte tüüpi laboritehnika, mida patoloog võib läbi viia biopsia jaoks kogutud koeprooviga.

Immunohistokeemia (IHC) võimaldab patoloogidel saavutada midagi märkimisväärset. See võimaldab neil näha palja silmaga nähtamatuid haigusnähte. IHC kasutab teie keha võimsaid võitlejaid, antikehi, et paljastada haigusi põhjustavaid kahjulikke mikroskoopilisi aineid. See on vaid üks meetod, mis võimaldab teadlastel laboris vähiga uurida, diagnoosida ja – mis kõige tähtsam – võidelda.

Immunohistokeemia on meetod koeuuringutes, kus kasutatakse antikehi ja spetsiifilisi värvaineid, et tuvastada ja lokaliseerida konkreetseid molekule või rakke kudedes. See meetod on oluline meditsiinis, eriti vähkkasvajate diagnoosimisel ja ravi jälgimisel. Immunohistokeemiat kasutatakse ka teistes valdkondades, nagu immunoloogia ja neuroteadus. Selle tulemused aitavad paremini mõista Haiguste patogeneesi ja arendada uusi ravivõimalusi.